最全梳理c-MET基因突变和靶向药物

2017-05-11 19:12:15癌度

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c-MET基因突变和靶向药物

c-MET基因的突变形式

　　c-MET原癌基因存在于人类7号染色体的长臂，蛋白产物是c-MET酪氨酸激酶受体，c-MET基因在胚胎期和成人期均有表达。C-MET的配体是肝细胞生长因子（HGF），是由间质细胞分泌，HGF和c-MET的结合能够促进细胞的增殖、迁移、分化和形态改变。HGF/c-MET信号通路受到复杂的、高度的调节，在细胞增殖、分化和运动扮演重要作用。

HGF/c-MET信号通路的异常主要有以下三种机制

在基因层面包括基因重排、激活突变和基因扩增；

转录上调导致的c-MET蛋白的过表达；

通过配体依赖的自分泌或旁分泌机制使得c-MET蛋白持续激活；

c-MET基因突变、MET和HGF过表达都可导致非小细胞肺癌的EGFR-TKI的耐药，我们来看看一篇综述里统计的NSCLC中c-MET基因的突变情况。

注：不同的研究使用的检测方法不同，统计突变频率存在一定差异。

图1：不同研究文献统计出的c-MET的突变形式、频率

通过上图，我们可以看出不同文献检测出的c-MET基因突变的频率差异还是较大的，这可能与使用的检测方法，研究者的主观态度等影响的（如DNA扩增几倍算是扩增？免疫组化结果怎么判读算是阳性？），详细可见参考文献3，进行详细阅读。但大体趋势是肺腺癌里c-MET的基因突变较为高一些，c-MET蛋白过量表达的频率高一些。C-MET基因扩增和14号外显子跳跃式突变频率并不是特别高，后者的频率在3%左右,但是MET基因14外显子跳跃突变在肺肉瘤样癌的突变频率高达22%。这也提出一个问题，除了14号外显子跳跃式突变这种比较明确的基因突变外，c-MET基因扩增和蛋白过表达的检测结果是否可以准确指导靶向用药？阴性的患者就不能去尝试靶向药物了，阳性的患者就一定有效吗？我想检测结果只能参考，而不能绝对。

图2：HGF和c-MET基因的突变形式和频率

图2是另一个总结，即HFG和c-MET基因的突变形式，HGF蛋白过表达频率为41.2%，c-MET蛋白过表达频率为33.6%，c-MET基因扩增9.8-20.0%，c-MET突变的频率为0.8-4.0%。

c-MET基因在不同肿瘤类型的突变情况

c-MET和它的配体HGF在不同的癌种都有异常的过表达，突变和DNA水平的扩增，我们看一篇2016年新发表文献对不同癌种中HGF、c-MET基因异常的统计情况。

图3是HGF蛋白的在不同癌种的阳性表达情况，Rilotumumab、Ficlatuzumab、Onartuzumab几种蛋白药物是针对HGF的，目前处于临床的不同阶段。

图3：HFG（与c-MET受体蛋白的配体）在不同癌种表达的情况

需要注意的是阻断c-MET靶点，不只是要对c-MET进行攻击，对其配体HGF也是可以的，而且我们后面会看到，对着HGF也是有靶向药物。

下面我们来看一下c-MET在不同癌种的表达、突变情况，大家注意一下相应的频率，也就可以对应是否有必要去做相应的检测。

注：FISH检测，MET/CEP7＞2，或大于10%的癌细胞MET的拷贝数大于20，不同研究文献样本数和检测技术不同，突变频率有差异。

图4：c-MET在不同的肿瘤类型的突变形式和相应的频率

上面的c-MET的突变形式有3种，分别是蛋白水平的高表达，DNA水平的扩增，还有是DNA水平的序列改变——基因突变，我们综合了最新文献报道的不同癌种的突变的频率，供大家参考。对于大家比较关心的肺癌，可以看出来耐药前和EGFR-TKI耐药后，c-MET的扩增是不同的。而且不同癌种都有c-MET的突变，是否都可以使用c-MET的靶向药物呢，我们后面看看相应的药物情况。

c-MET突变的检测方式

c-MET基因突变形式有基因突变、蛋白高表达、和基因扩增。相应的检测方法有荧光定量PCR，原位免疫荧光杂交（FISH），和免疫组化（IHC）。前面两者特异性好，而IHC的灵敏度高。

c-MET基因突变的频率不高，2015年ASCO报道的概率是3%，最常见的是14外显子跳跃式突变。基因突变的检测方法是用基因测序方法较好，准确度较高，还可检测出潜在的其他突变位点。直接测序法无法检测出c-MET拷贝数目的变化，不能筛选出所有适合c-MET治疗的人群。

RT-PCR和FISH可以用于检测基因扩增，RT-PCR检测速度快，但是对DNA片段质量要求高，很多石蜡标本里DNA降解了，出现假阴性结果。FISH评估阳性的标准是MET/CEP7的比值，以及每一个细胞的基因拷贝数量及其阳性细胞所占的比例。

蛋白过表达可以使用IHC检测，依据两种条件判断是否为阳性。①H-评分，根据样本染色强度（0-4）和阳性肿瘤细胞所占细胞总数的比例（0-100%），只要H-评分大于200则为阳性。②将肿瘤细胞分为MET高表达和低表达两类，3+（≥50%的肿瘤细胞呈强阳性），2+（≥50%肿瘤细胞呈阳性/弱阳性且＜50%肿瘤细胞呈强阳性），1+（≥50%的肿瘤细胞呈弱阳性且阳性细胞数＜50%），0（无染色或任何强度的肿瘤细胞数均＜50%），2+或3+被定义为高表达。IHC检测c-MET的有效性可能较FISH法能更敏感地筛选出合适靶向治疗的人。

最近的一项研究表明检测c-MET蛋白表达和基因扩增，均和MET蛋白磷酸化没有显著相关性，IHC检测的是c-MET总蛋白的表达量，而MET蛋白只有在被异常激活后才会在肿瘤增殖发挥作用，因此通过IHC分析MET蛋白的磷酸化状态更有指导意义。但是这个对于大多数检测机构都是更加难的事情。

c-MET的靶点药物

对于c-MET的靶向药物，大家并不陌生，克唑替尼、卡博替尼、INC280等，这里我们把目前正在进行临床试验的靶向药物、它们的靶点以及相应的介绍系统地梳理一遍。