小荧光,大作用--萤光素酶报告基因技术
一、什么是萤光素酶 (Luciferase)
萤光素酶:自然界中能够催化底物产生生物发光的酶的统称,常见于昆虫和海洋生物,如萤火虫、水母等生物体内。
海洋藻类 发光真菌
发光甲虫 水母
二、萤光素酶催化的生物发光反应
(Bioluminescence Reactions)
三、荧光和生物发光
(1)荧光(Fluorescence):需要激发光激发,荧光分子吸收激发光能量后发出荧光。
(2)生物发光(Bioluminescence):由萤光素酶催化的反应产生发光信号,属于一类特殊形式的化学发光,不需要激发光。
四、什么是报告基因 (Reporter Gene)
(1)报告基因:是一种编码易被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,其表达产物非常容易被鉴定。
(2)报告基因通常是容易检测的蛋白或者酶
(3)采用酶类做为报告基因,具有放大信号的作用
(4)常见的报告基因:
(5)报告基因可以通过比色、荧光、生物发光或放射的方法进行检测。
四、萤光素酶作为报告基因的优势
五、实验流程
六、实验要素
七、萤光素酶报告基因技术应用
佰昊生物采用Promega的双荧光素酶报告基因检测系统(萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶),为您提供更加科学的检测手段。双报告基因中, 海肾荧光素酶报告基因作为内对照,使萤火虫荧光素酶报告基因的检测均一化。通过这种方法,可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性, 比如培养细胞的数目和活力的差别, 细胞转染和裂解的效率。
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